STABILISATION DE L’HUILE DE SOJA BRUTE PAR LES EXTRAITS METHANOLIQUES ET LES POUDRES DE QUELQUES EPICES HABITUELLEMENT CONSOMMEES AU CAMEROUN

AUTEUR

TONFACK DJIKENG Fabrice

fdjikeng@yahoo.fr

DIRECTEUR

Dr. WOMENI Hilaire Macaire

OBJECTIF

Trouver quelques sources naturelles d’antioxydants du Cameroun pouvant être utilisées pour stabiliser les huiles.

                                                

RESUME

Le présent travail est axé sur la stabilisation de l’huile de soja brute par les extraits méthanoliques et les poudres de quelques épices habituellement consommées au Cameroun. Il a pour objectif de trouver les sources naturelles d’antioxydants qui, de par leur activité antioxydante, pourraient être utilisées  pour stabiliser les huiles.

Le pouvoir antioxydant des extraits méthanoliques et des poudres de 12 épices (Pimpinella anisum, Scorodophleus zenkeii, Xylopia parviflora, Eugenia caryophyllus, Fagara leprieurii, Fagara macrophylla, Monodora myristica, Olax subscorpioidea, Xylopia aethiopica, Allium sativum, Zinziber officinale et Cinnamomum zeylanicum) a été évalué. Le criblage phytochimique a révélé la présence des phénols dans tous les extraits excepté celui d’Allium sativum. La teneur en phénols totaux, le test au DPPH et la concentration efficiente-50 variaient significativement (P<0,05) de 1,34 à 17,72 g GAE/100 g ; 18,91 à 96,39% et 0,014 à 945,66 µg/ml respectivement.

Les extraits Zinziber officinale, Olax subscorpioidea, Fagara macrophylla, Eugenia caryophyllus et Xylopia parviflora qui ont présenté les plus hautes teneurs en phénols totaux ont parallèlement montré les activités antioxydantes les plus élevées à l’issu du test au DPPH°.

Par la suite, l’activité antioxydante des extraits et des poudres ci-dessus cités a été évaluée en utilisant l’huile de soja brute comme substrat d’oxydation. Les échantillons d’huile stabilisés aux extraits (500 ppm) et aux poudres (1000 ppm) ont été stockés à l’étuve à 65°C pendant 24 jours, en raison d’un cycle de 8 h de chauffage par jour, puis des prélèvements étaient faits après chaque 4 jours pour analyses par détermination de leur indice d’iode, de peroxyde et d’acide.

Les résultats ont montré que 7 des 12 extraits : Zinziber officinale, Cinnamomum zeylanicum, Scorodophleus zenkerii, Monodora myristica, Xylopia aethiopica, Allium sativum,, Fagara Leprieurii et 7 des 12 poudres : Pimpinella anisum, Zinziber officinale, Cinnamomum zeylanicum, Scorodophleus zenkerii, Fagara leprieurii, Monodora myristica, Allium sativum réduisent significativement (P<0,05) l’altération des doubles liaisons des acides gras ainsi que la formation des hydroperoxydes dans l’huile de soja brute comparé au contrôle (huile sans additif).

Nous pouvons donc conclure que les extraits et poudres ci-dessus énumérés stabilisent l’huile de soja brute et pourraient bien substituer les antioxydants de synthèse, ce qui contribuerait à la sécurité alimentaire et par conséquent à la santé du consommateur.

                                                                               

Mots clés : Antioxydants naturels, épices, oxydation des lipides, stabilisation, huile de soja.

                                                                                

ABSTRACT

The present study is centered on the stabilization of the crude soya oil by methanolic extracts and powders of somes spices usually consumed in Cameroon. ¶It aims at finding the natural sources of antioxydants which by their antioxydant activity, could be used to stabilize oils.

The antioxydant potential of methanolic extracts and powders of 12 spices (Pimpinella anisum, Scorodophleus zenkeii, Xylopia parviflora, Eugenia caryophyllus, Fagara leprieurii, Fagara macrophylla, Monodora myristica, Olax subscorpioidea, Xylopia aethiopica, Allium sativum, Zinziber officinale and Cinnamomum zeylanicum) was assessed. The phytochemical screening revealed the presence of phenols in all the spices except that of Allium sativum. Total phenolic content, DPPH° radical scavenging activity and efficient concentration-50 of the extracts varied significantly (p<0,01) ranging from 1.34 to 17.72 g GAE/100 g; 18.91 to 96.39%, and 0.014 to 945.66 µg/ml respectively.

Extract of Zinziber officinale, Olax subscorpioidea, Fagara macrophylla, Eugenia caryophyllus and Xylopia parviflora which presented the highest total phenolic content showed a strongest antioxydant activitiy with regard to the DPPH°.¶

 ¶Furthermore, the antioxidant effectiveness of the extracts and powders was assessed using crude soybean oil as oxidation substrate. Soybean oil samples stabilized with extracts (500 ppm) and powders (1000 ppm) were subjected to accelerated storage at 65°C oven heating for 24 days, a cycle of 8 h heating per day. Analyses were carried out after regular intervals of 4 days by determining iodine, peroxide and acid value of oil samples.

Results showed that 7 of the 12 extracts: Zinziber officinale, Cinnamomum zeylanicum, Scorodophleus zenkerii, Monodora myristica, Xylopia aethiopica, Allium sativum, Fagara Leprieurii and 7 of the 12 powders: Pimpinella anisum, Zinziber officinale, Cinnamomum zeylanicum, Scorodophleus zenkerii, Fagara leprieurii, Monodora myristica, Allium sativum significantly reduce (P<0.05) the deterioration of fatty acid double bonds and peroxide formation in soybean oil compared with control.

We can thus conclude that the extracts and powders enumerated above stabilize crude soybean oil and could substitute synthetic antioxydants, which would contribute to food safety and consequently to the health of the consumer.¶

	Keywords : Natural antioxidant, spices, lipids oxidation, stabilisation, soybean oil.

 

DATE DE SOUTENANCE

Mardi, le 29 Mai 2012

 JURY

PRESIDENT : Pr. TCHOUMBOUE Joseph (Professeur)

RAPPORTEUR : Dr. WOMENI Hilaire Macaire (Chargé de cours)

                     EXAMINATEURS : Pr. GATSING Donatien (Maitre de Conférence)

                                           Dr. ZAMBOU NGOUFACK François (Chargé de cours)

IMPACT OF A HOST GENE IN HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS- INFECTION: DISTRIBUTION OF A CC CHEMOKINE RECEPTOR TYPE 2-V64I (CCR2-64I) IN A SAMPLE POPULATION FROM DSCHANG

AUTHOR:MEKUE MOUAFO Chapdeleine Linda

Chapdylinda2000@yahoo.fr

CO-SUPERVISOR: Dr.  NKENFOU Céline

SUPERVISOR: Pr.  KUIATE Jules-Roger

OBJECTIF: determination of the distribution of the CCR2-64I mutation in a sample population from Dschang and analyse the association of tis host gene polymorphism with HIV serostatus.

RESUME 

            VIH/SIDA est une pandémie qui sévie beaucoup dans les pays en voie de développement. Le Cameroun, en Afrique centrale regorge l’une des plus grandes épidémies dans cette sous-région avec une prévalence estimée à 5.3% en 2009 (UNAIDS, 2009), 5.1% en 2010 and 4.3% en 2011 (EDS-MICS, 2011). Les chimiokines sont des cytokines qui peuvent bloquer la réplication du VIH aux cellules cibles, mais quand ils sont mutés peuvent inhiber la pathogénicité du VIH ou retarder la progression de l’infection au SIDA, ainsi peuvent êtres des cibles pour la mise au point des vaccins. CCR2 est l’un des récepteurs de chimiokines, présent à la surface des macrophages, cellules dendritiques et cellules Th- mémoire, actif dans la réponse immunitaire. Il agit comme récepteur de la MPC-1(CC chimiokine) et comme co-récepteur pour l’entrée du VIH dans les cellules cibles. Une substitution de la guanine par adénine à la position 190 cause une substitution de la valine par l’isoleucine à la position 64 caractérisant la mutation CCR2-64I. Cette mutation a été identifiée comme facteur important dans le retardement de la progression de l’infection au VIH. Mais il y’a manque d’information sur la distribution de cette mutation dans les populations africaines et au Cameroun en particulier. Ainsi le but de notre étude était de déterminer la prévalence du polymorphisme CCR2-64I et de voir si ce polymorphisme était lié au statut VIH sérologique au sein d’une population de Dschang (Cameroun).

Après extraction de l’ADN à l’aide du  « QIamp DNA Mini kit », un fragment de 380bp du gène CCR2 a été amplifié par PCR, puis le produit de PCR digéré par l’enzyme de restriction à activité endonucleasiqueFokI, et le génotype de chaque échantillon déterminé par migration électrophoretique sur gel d’agarose. La présence de cette mutation a été identifiée sur 27% de la population étudiée, avec une fréquence d’allèle de 0.15. La prévalence des hétérozygotes CCR2-64I/CCR2 était de 24.3%, et celle des homozygotes mutant CCR2-64I/ CCR2-64I était de 2.9%. La méthodologie de caractérisation des gènes de l’hôte utilisant le sang frais peut utiliser les DBS comme alternative d’échantillonnage dans les endroits reculés ou chez les enfants.

            Nous avons découvert que de génération en génération la distribution de ce dernier est la même et donc est en équilibre. Ainsi nous pouvons dire qu’avec le temps il n’y a pas eu de facteurs externes qui ont perturbé la fréquence de cette mutation. Aussi nous avons trouvé que la distribution de cet allèle n’était pas liée au statut sérologique VIH.

Mots clé : mutation CCR2-64I, co-récepteur du VIH, population du Cameroun, polymorphisms.

ABSTRACT

HIV/AIDS is a pandemic disease that strikes developing nations. Cameroon, in central Africa, has one of the largest HIV epidemics in this sub-region with an adult national prevalence estimated at 5.3% in 2009 (UNAIDS, 2009), 5.1% in 2010 and 4.3% in 2011 (EDS-MICS, 2011). Chemokines are cytokines that can block HIV replication and their receptors play an important role in fusion of HIV to target cells, but when mutated can inhibit the pathogenicity of HIV or delayed the progression of HIV infection to AIDS, hence being a start point in vaccine trials. CC Chemokine receptor type 2 (CCR2)is one of the chemokine receptor family, active in the immune response. It is found on the surface of macrophages, T-memory cells and dendritic cells. CCR2 acts as a receptor for MCP-1 (CC chemokine) and as a co-receptor for HIV-1 cell-target entry. A guanine to alanine substitution at position 190 characterizes the CCR2-64I mutation, causing valine to isoleucine substitution in codon 64, given a polymorphism among individuals. This mutation has been identified as an important factor for delaying progression to AIDS. But limited information is available on the distribution among African populations (and particularly Cameroon) of this host genetic polymorphisms conferring resistance to HIV-1 infection or slowing HIV disease progression. This is why the aim of our study was to determine the distribution of the CCR2-64I mutation in a sample population from Dschang (Cameroon) and to see if this can explain the outcome of HIV/AIDS.

The DNA extraction was done using the QIamp DNA Mini kit, after a portion of 380bp of the CCR2 gene was amplified and the genotyping done by RFLP using the restriction endonuclease enzyme Fok I, the product analysed by migration on an agarose gel electrophoresis. The presence of the AIDS-related polymorphisms CCR2-64I mutant allele was identified in 27% of the population studied with an allele frequency of 0.15. The prevalence was 24.3%, for CCR2-64I heterozygotes, and 2.9% for the CCR2-64I homozygotes mutant. We have also concluded that the methodology of characterization of host gene from fresh blood sample can be also applied to DBS as sampling alternative, if the study is carried out in remote areas or on infants.

This study is the second one in Cameroon that intends to give the frequency distribution of the CC2-64I in a population of Cameroon. We have found that from generation to generation there are no external factors that disturb the genetic distribution of this polymorphism. The distribution of this allele was not link to the HIV status.

Key words: CCR2-64I mutation, population of Cameroon, HIV co-receptor, polymorphism

DATE OF THE DEFENCE: 29 may 2012

JURY:

- President : Pr. PAMO Etienne

- Reporter: Pr. KUIATE Jules-Roger

                   Dr. Nkenfou Céline

-         Member: Dr. Tume Christopher

CARACTERISATION CHIMIQUE ET EVALUATION DES PROPRIETES INSECTICIDES DES HUILES DES FRUITS DE Piper capense L. (Piperaceae) ET Xylopia parviflora (A. Rich.) Benth. (Anonnaceae) A L’EGARD DES ADULTES DE Acanthoscelides obtectus (Say) et Callosobruchus maculatus (Fab.)(Bruchidae)

Thèse de Master en Biochimie
Université de Dsschang
Faculté des Sciences
Département de Biochimie
Par

 WOGUEM Verlaine

                     Sous la co-direction    de                                                                                                                   

Pr. TAPONDJOU AZEFACK Léon       et     Dr. WOMENI Hilaire Macaire

Maître de Conférences                                                         Chargé de Cours

OBJECTIF GENERAL

Tester l’activité insecticide des huiles essentielles et végétales des fruits de Piper capense et Xylopia parviflora contre Acanthoscelides obtectus  et Callosobruchus maculatus .

RESUME

L’utilisation des biopesticides d’origine végétale dans la lutte contre les insectes ravageurs des cultures constitue de nos jours, une alternative à l’utilisation abusive des pesticides de synthèse dont les conséquences néfastes sur la santé de l’homme et l’environnement ne sont plus à démontrer. C’est dans cette perspective que les huiles des fruits de P. capense et de X. parviflora ont été testées sur les insectes ravageurs du haricot commun et du niébé.                                                                                                             L’extraction par hydrodistillation ou par macération dans l’hexane des fruits de ces deux plantes a donné respectivement des huiles essentielles (HE) et végétales (HV) dont la composition chimique a été déterminée par CPG/SM. Les tests d‘efficacité par répulsion, par contact sur papier filtre et sur graines de haricot commun ou de niébé traité par ces huiles, ainsi que les tests de fumigation ont été effectués. L’impact de ces différents produits a été évalué sur l’émergence de la première génération.                                                                            L’HE de P. capense est plus riche que celle de X. parviflora (1,9 et 0,6 %) alors que l’inverse s’observe avec les HV (4,98 et 7,46 %). L’analyse de ces HE montre qu’elles sont composées majoritairement des monoterpènes hydrocarbonés (58 et 51,3 % respectivement pour P. capense et X. parviflora) suivis des sesquiterpènes hydrocarbonés (23,2 %) pour P. capense et des monoterpènes oxygénés (16,7 %) pour X. parviflora. L’HE de P. capense a été plus répulsive vis-à-vis de C. maculatus que A. obtectus (PR de l’HE= 93,00±7,63 % contre 69,00±7,63 %), alors que l’effet inverse a été observé avec l’HV (PR de l’HV= 74,00±16,28 % contre 75,00±14,18 %). L’HE de X. parviflora a montré un effet répulsif vis-à-vis de C. maculatus et attractif vis à vis de A. obtectus. Ce dernier s’est montré plus sensible aux vapeurs des différentes HE par fumigation que C. maculatus (0,067 et 0,12 µl/cm³ respectivement de X. parviflora et P. capense contre 0,503 et 0,132µl/cm³). Les HE ont été toxiques sur graines. Cette toxicité s’est illustrée par l’inhibition après 38 jours de l’émergence de la première génération. Cependant, les HV et les FP à base d’HE de P. capense n’ont pas présenté d’effets toxiques appréciables.                                                                     Une protection durable contre A. obtectus et C. maculatus est possible en utilisant les HE des fruits séchés de X. parviflora et de P. capense constituant ainsi une solution alternative à l’utilisation des insecticides chimiques.

 Mots clés: huile essentielle, huile végétale, P. capense, X. parviflora, A. obtectus, C. maculatus

ABSTRACT

The use of biopesticides of vegetable origin to fight against culture’s devastating insects constitutes nowadays an alternative to the abusive use of the pesticides of synthesis which harmful effects on human health and the environment are not any more to show. It is from this point of view that oils of the fruits of P. capense and X. parviflora were tested on the devastating insects of common bean and niebe.                                                                              The extraction by hydrodistillation or maceration in hexane of the fruits of these two plants gave essential oils (EO) and vegetable oil (VO) of which chemical composition was determined by GC/MS. The tests of efficiency by repulsion, contact on filter paper, contact on common bean seeds or niebe treated by these oils against C. maculatus and A. obtectus, as well as fumigation tests were carried out. The impact of each of these products was tested over the time on the emergence of the first generation of these bruchids. The EO of P. capense is richer than that of X. parviflora (1.9 and 0.6 %) whereas the reverse is observed with the VO (4.98 and 7.46 %). The analysis of these EO shows that they are mainly contain hydrocarbon monoterpenes (58 and 51.3 % respectively for P. capense and X. parviflora) followed by hydrocarbon sesquiterpenes (23.2 %) for P. capense and of monoterpenes oxygenated (16.7 %) for X. parviflora. The EO of P. capense was more repulsive with respect to C. maculatus than A. obtectus (PR = 93.00 ± 7.63 % against 69.00 ± 7.63 %), whereas the opposite effect was observed with the VO (PR = 74.00 ±16.28 % against 75.00 ± 14.18 %). The EO of X. parviflora showed repulsive  and attractive effects respectively against C. maculatus and A. obtectus. A. obtectus was shown more sensitive to the vapor of different EO by fumigation than C. maculatus (0.067 and 0.12 µl/cm³ respectively of X. parviflora and P. capense against 0.503 and 0.132µl/cm³).Toxicity of EO on seeds was shown by the inhibition of the emergence after 38 days of the emergence of the first generation; however the VO and the aromatized powder based on HE of P. capense did not present appreciable toxic effects. A durable protection against A. obtectus and C. maculatus is possible by using the EO of the dried fruits of X. parviflora and P. capense, representing an alternative solution to the use of synthetisized insecticides.       

Key words: Essential oil, vegetable oil, P. capense, X. parviflora, A. obtectus, C. maculatus

Soutenue le mercredi le 30 Mai 2012

JURY

PRESIDENT : Pr KUIATE Jules-Roger

RAPPORTEUR: Dr WOMENI Hilaire Macaire

MEMBRE:Dr TELEFO Phélix Bruno

MEMBRE: Dr ZAMBOU François